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超高效液相色譜的原理是哪些

時(shí)間：2024-01-22 來(lái)源：作者：我要糾錯(cuò)

超高效液相色譜（UHPLC）技術(shù)由于其高效和快速的分析速度，在現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室分析中已越來(lái)越受到青睞。它是高效液相色譜（HPLC）技術(shù)的一個(gè)升級(jí)版本，通過(guò)使用小于2微米尺寸的顆粒作為固定相，配合更高的操作壓力，實(shí)現(xiàn)了更快的分析速度和更高的分辨率。UHPLC的發(fā)展代表了液相色譜技術(shù)的一大進(jìn)步，使得它成為了許多科研和工業(yè)領(lǐng)域中不可或缺的分析工具。

UHPLC的顯著特點(diǎn)之一是其使用的固定相顆粒尺寸遠(yuǎn)小于傳統(tǒng)HPLC所使用的。傳統(tǒng)HPLC中使用的顆粒尺寸通常在3至5微米之間，而UHPLC能夠使用小于2微米的顆粒，這大幅增加了色譜柱的理論塔板數(shù)，從而提供了更好的分辨率和峰形。顆粒越小，固定相的表面積就越大，樣品分子在固定相與移動(dòng)相之間的傳遞也就越迅速，這樣不僅提高了分離效率，同時(shí)也降低了分析所需的時(shí)間。

與此同時(shí)，為了適應(yīng)更小的顆粒和提高的分離效率，UHPLC系統(tǒng)能夠承受更高的操作壓力，通常超過(guò)10000 psi。相比之下，傳統(tǒng)的HPLC系統(tǒng)通常工作在不超過(guò)3000至5000 psi的壓力下。這種高壓力的應(yīng)用，允許使用更細(xì)小的柱內(nèi)徑，而且有助于維持合理的流動(dòng)速率，即使在使用細(xì)小顆粒的情況下。這樣不僅減少了所需的溶劑量，還縮短了分析時(shí)間，提高了樣品吞吐量。

高效液相色譜儀的原理是基于混合物中不同組分在固定相與移動(dòng)相之間的相對(duì)親和力差異。樣品在注入系統(tǒng)后，會(huì)被移動(dòng)相（也稱為流動(dòng)相）帶入包含固定相的色譜柱。不同的樣品組分會(huì)由于與固定相的相互作用力不同而在色譜柱中以不同的速度移動(dòng)，從而實(shí)現(xiàn)分離。檢測(cè)器則根據(jù)各組分的特性，如紫外吸收、熒光或折射率等，檢測(cè)通過(guò)色譜柱的組分。每一個(gè)組分的檢測(cè)信號(hào)通常被繪制成峰，組成色譜圖譜。UHPLC與HPLC在原理上是相同的，只是UHPLC在操作壓力、顆粒大小和系統(tǒng)精度上有所提高。